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月示蛋白胨具體該如何使用呢？
發(fā)布時間： 2025-11-23 點(diǎn)擊次數(shù)： 223次月示蛋白胨是一種重要的微生物培養(yǎng)基原料，在微生物學(xué)研究和生物發(fā)酵領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。其是混合酶消化組織蛋白，是用精蛋白為基質(zhì)，經(jīng)特殊水解提取制備的干燥粉末，營養(yǎng)豐富，富含大量高分子質(zhì)量多肽、游離氨基酸和生長促進(jìn)因子，可做多種培養(yǎng)基的基礎(chǔ)材料。適宜于細(xì)菌產(chǎn)毒素培養(yǎng)和營養(yǎng)要求苛刻的微生物培養(yǎng)。蛋白胨是將肉、酪素或明膠用酸或蛋白酶水解后干燥而成的外觀呈淡黃色的粉劑，具有肉香的特殊氣息。蛋白質(zhì)經(jīng)酸、堿或蛋白酶分解后也可形成蛋白胨。月示蛋白胨其使用方法需結(jié)合培養(yǎng)基的配制流程進(jìn)行，以下是詳細(xì)步驟：1、計(jì)算與稱量根據(jù)目標(biāo)微生物的營養(yǎng)需求，按配方比例計(jì)算月示蛋白胨的用量（如每升培養(yǎng)基添加10-20g）。使用潔凈的稱量工具（如電子天平、牛角匙）快速稱取蛋白胨，避免長時間暴露吸濕。若需與其他成分（如牛肉膏、NaCl）混合，需按順序依次稱取，并防止交叉污染。2、溶解與混合將稱取的蛋白胨加入適量蒸餾水或去離子水中，用玻璃棒攪拌至初步溶解。若配方含其他成分（如葡萄糖、瓊脂），需分步溶解：先溶解蛋白胨等易溶物質(zhì)，再加入難溶成分（如瓊脂需加熱溶解），最后補(bǔ)足水量至所需體積。3、調(diào)節(jié)pH值用精密pH試紙或酸度計(jì)測量溶液原始pH值。若pH偏低，逐滴加入1mol/L NaOH溶液；若偏高，則加入1mol/L HCl溶液，邊加邊攪拌并實(shí)時監(jiān)測pH，直至達(dá)到目標(biāo)值（如7.2-7.6）。注意：避免pH調(diào)節(jié)過頭，否則需回調(diào)，可能影響培養(yǎng)基離子濃度。4、過濾（可選）若培養(yǎng)基需高度透明（如用于觀察菌落形態(tài)），可趁熱用濾紙或多層紗布過濾，去除雜質(zhì)。普通實(shí)驗(yàn)可省略此步驟。5、分裝與包扎液體培養(yǎng)基：分裝至試管或三角瓶，裝量不超過容器容積的1/2（試管裝至1/4高度，便于搖勻）。固體培養(yǎng)基：分裝后加入瓊脂（1.5%-2%），加熱溶化后分裝，滅菌后冷卻凝固成斜面或平板。包扎：試管口塞棉塞（或泡沫塑料塞），外包牛皮紙并用麻繩扎緊；三角瓶同樣包扎，標(biāo)注培養(yǎng)基名稱、配制日期。6、滅菌采用高壓蒸汽滅菌法：121℃（0.103MPa）滅菌15-20分鐘。特殊情況：若培養(yǎng)基含葡萄糖等易分解成分，可分開滅菌（蛋白胨溶液與葡萄糖溶液分別滅菌后混合），或在中性pH條件下滅菌再調(diào)pH。7、使用與儲存使用前：檢查培養(yǎng)基是否渾濁、有無污染（如長菌斑）。使用中：無菌操作下傾注平板或接種微生物，按目標(biāo)條件培養(yǎng)（如35℃、18-24小時）。儲存：未滅菌的培養(yǎng)基需冷藏（2-8℃）；滅菌后培養(yǎng)基若未及時使用，應(yīng)冷藏保存并在1周內(nèi)用完。
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